Bộ phát hiện axit nucleic trên khỉ đậu mùa (MPV) (Phương pháp PCR thời gian thực)

[Mục đích sử dụng]

Bộ dụng cụ này được sử dụng để phát hiện Virus đậu mùa (MPV) trong huyết thanh hoặc mẫu dịch tiết của tổn thương bằng cách sử dụng thực
hệ thống PCR thời gian.

[Nguyên tắc kiểm tra]
Nguyên tắc phát hiện thời gian thực dựa trên xét nghiệm 5'nuclease fluorogenic.Trong phản ứng PCR, DNA polymerase sẽ phân cắt đầu dò ở đầu 5 'và chỉ tách thuốc nhuộm phóng xạ khỏi thuốc nhuộm dập tắt khi đầu dò lai với DNA đích.Sự phân cắt này dẫn đến tín hiệu huỳnh quang được tạo ra bởi thuốc nhuộm phóng xạ đã phân cắt, được theo dõi thời gian thực bởi hệ thống phát hiện PCR.Chu kỳ PCR mà tại đó sự gia tăng tín hiệu huỳnh quang được phát hiện ban đầu tỷ lệ với lượng sản phẩm PCR cụ thể.Theo dõi cường độ huỳnh quang trong thời gian thực cho phép phát hiện sản phẩm tích lũy mà không cần phải mở lại ống phản ứng sau khi khuếch đại.Bộ công cụ PCR thời gian thực của Virus đậu mùa có một hệ thống sẵn sàng sử dụng cụ thể để phát hiện Virus đậu mùa thông qua phản ứng chuỗi polymerase (PCR) trong hệ thống PCR thời gian thực.Bản gốc chứa thuốc thử và enzym để khuếch đại DNA của Virus đậu mùa khỉ.Huỳnh quang được phát ra và đo bằng đơn vị quang học của hệ thống thời gian thực trong quá trình PCR.Việc phát hiện đoạn DNA của Virus Monkeypox đã khuếch đại được thực hiện trong kênh FAM của máy đo huỳnh quang với chất khử huỳnh quang BHQ1.Bộ đệm chiết xuất DNA có sẵn trong bộ dụng cụ và các mẫu huyết thanh hoặc dịch tiết tổn thương được sử dụng để tách chiết DNA.Ngoài ra, bộ này còn chứa một hệ thống để xác định khả năng ức chế PCR bằng cách đo huỳnh quang Cy5 của kiểm soát nội bộ (IC).Một đối chứng dương tính bên ngoài được xác định là 1 × 10 7copies / ml được cung cấp cho phép xác định tải lượng gen.

[Các thành phần của Bộ công cụ chẩn đoán]

[Dụng cụ áp dụng]
Bộ chẩn đoán áp dụng cho MA-6000, dòng ABI, dòng Bio-Rad, Roche LightCycler R480, Cepheid
Dòng SmartCycler, Rotor-Gene và các thiết bị PCR định lượng thời gian thực đa kênh khác.

[Yêu cầu về mẫu]
1.Loại mẫu: huyết thanh, hoặc mẫu dịch tiết tổn thương

2. Mẫu vật có thể được chiết xuất ngay lập tức hoặc đông lạnh ở -20 ° C đến -80 ° C.

3. Việc vận chuyển bệnh phẩm lâm sàng phải tuân thủ các quy định của địa phương đối với việc vận chuyển tác nhân gây bệnh.

[Phán đoán kết quả mẫu]
1.Mẫu thử nghiệm phát hiện đường cong khuếch đại kiểu S điển hình trong FAM≤38 và Cy5 có đường cong khuếch đại điển hình, Ctis≤38. Mẫu có thể được đánh giá là MPVpositive.

2.Nếu mẫu thử nghiệm không có Ct hoặc Ct> 38 trong các kênh FAM và có đường cong khuếch đại loại S điển hình trong kênh Kiểm soát nội bộ (Cy5), thì Ctis ≤38. Mẫu có thể được đánh giá là âm độ MPV.

3.Nếu mẫu thử nghiệm không có đường cong khuếch đại kiểu S điển hình (Không có giá trị Ct) hoặc giá trị Ct> 38 được phát hiện trong FAM và kênh Cy5 không có đường cong khuếch đại điển hình (Không có giá trị Ct) hoặc giá trị Ct> 38, nó có nghĩa là có một vấn đề với chất lượng của mẫu hoặc một vấn đề với hoạt động.Nếu kết quả không hợp lệ, bạn nên tìm và loại bỏ nguyên nhân, thu thập mẫu thử và kiểm tra lại (nếu kết quả thử nghiệm vẫn không hợp lệ, vui lòng liên hệ với công ty).

[Hạn chế của phương pháp phát hiện]
1. Kết quả kiểm tra của tickit chẩn đoán chỉ có thể được sử dụng để tham khảo tại phòng khám.Việc chẩn đoán lâm sàng và điều trị bệnh nhân cần được xem xét kết hợp với các triệu chứng, dấu hiệu, bệnh sử và các tình trạng liên quan khác của họ.

2.Kết quả âm tính có thể xảy ra khi nồng độ của dnucleicacid phát hiện trong mẫu thử nghiệm thấp hơn giới hạn phát hiện tối thiểu của bộ dụng cụ này.

3.Cải thiện xử lý phần mềm điều chỉnh lấy mẫu thu thập, vận chuyển, lưu trữ và xử lý dễ dàng tái tạo sự suy thoái DNA và kết quả âm tính sai.

4.Khi mẫu bị nhiễm chéo trong quá trình thu thập, vận chuyển, bảo quản và chế biến, rất dễ dẫn đến kết quả dương tính.

[Chỉ số Hiệu suất Sản phẩm]
1.LOD: Giới hạn của vi khuẩn / ml.2. Độ chính xác: Hệ số biến thiên (CV%) của độ chính xácCtvaluewithinbatch≤3%.3. Tính đặc hiệu: Phản ứng tổng hợpbetweenthekit và các mẫu dương tính, suchasSmallpoxVirus, CowpoxVirus, VacciniaVirus, v.v.

[Sơ đồ]
1. Toàn bộ quá trình phát hiện phải được thực hiện nghiêm ngặt theo các yêu cầu của sách hướng dẫn này trong khu vực chuẩn bị thuốc thử, khu vực xử lý mẫu và khu vực khuếch đại PCR, và quần áo thí nghiệm, dụng cụ và vật tư tiêu hao phải được sử dụng phụ thuộc và không thể Trộn.

2. Kiểm soát âm và dương phải được thiết lập cho mỗi thử nghiệm.

3.Tất cả thuốc thử trong bộ phải được rã đông hoàn toàn và trộn ở nhiệt độ phòng và ly tâm ngay trước khi sử dụng.

4. Tất cả các đối chứng âm tính và dương tính trong bộ dụng cụ phải được chuyển đến khu vực chuẩn bị mẫu và bảo quản riêng trước khi sử dụng lần đầu.

5. Để tránh nhiễu huỳnh quang, tránh chạm trực tiếp vào ống phản ứng PCR bằng tay không và tránh bất kỳ dấu hiệu nào trên ống phản ứng PCR.

6. Các thông số liên quan đến khuếch đại thiết bị phải được thiết lập phù hợp với các yêu cầu liên quan của sách hướng dẫn này và không thể trộn lẫn các thuốc thử khác nhau.

7. Chất thải sản phẩm trong quá trình thí nghiệm phải được khử độc trước khi loại bỏ.

[Chỉ mục của biểu tượng]

[HỘI THẢO NHÀ MÁY]

[NHÀ XUẤT KHẨU]

Magnus Internationa Limited

F12, New City Internationa Mansion A, 234 Huapao Ave.

Liuyang, tỉnh Hồ Nam 410300 Trung Quốc

Tiếp xúc:Goodwellmedical@gmail.com

[ĐẠI DIỆN ĐƯỢC ỦY QUYỀN]

Lotus NL BV

Koningin Julianaplein 10, 1e Verd, 2595AA, The Hague, Hà Lan.

[SẢN PHẨM VÀ TIÊU CHUẨN]